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如何在荧光显微镜下拍摄微弱荧光图像

更新时间:2012-06-18点击次数:1591
  通常在荧光显微镜下拍摄微弱的荧光影像是一个较大的问题,也是迄今为止显微镜厂家和影像采集装置制造者始终努力探求改善的一个重要内容。同时,也不断有新的装置在出现。 
  那我们应该怎样做呢?
  1)应尽量完善的样本的制备;
  2)应清洗干净的样品载体,如载玻片,盖玻片等,以近一步消除不必要的杂荧光干扰;
  3)应尽量选取高质量的荧光显微镜;
  4)应合理使用适合不同荧光光谱的荧光物镜;
  5)应选取zui合适的激发光源;
  6)应选取高敏感度和大动态范围的CCD,也可用EMCCD等;
  7)摄像头的调整可适当增加增益,但应尽量避免产生因其引起的信噪比降低等问题。建议可用过滤的方法近一步消除噪音信号;此外,在降低摄像头的分辨率问题上,很多使用者往往在拍摄荧光影像时,也会使用很高的分辨率,在通常情况下这是不常被推荐方法的。
  8)可适当增加曝光时间,同时也要注意时间延长对荧光样品的淬灭影响,建议可使用一些抗淬灭剂;
  9)更应注意降低拍摄环境的光线干扰,如背景光等,这也是非常值得注意的。